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Cette Ligne directrice décrit la méthode du brassage lent, laquelle permet la détermination des valeurs logarithmiques du coefficient de partage 1-octanol/eau (Poe) allant jusqu’à 8.2. Le coefficient de partage entre l'eau et 1-octanol (Poe) est défini comme étant le rapport des concentrations à l’équilibre de la substance d'essai pure dans du 1-octanol saturé avec de l'eau (Co) et dans de l’eau saturée avec du 1-octanol (Ce). Afin de déterminer le coefficient de partage, l'eau, le 1-octanol, et la substance d'essai sont équilibrés les uns avec les autres à température constante dans un réacteur thermostaté à 25° C, à l’abri de la lumière du jour et soumis à une agitation douce. L'échange entre les phases est accéléré par l'agitation. Les concentrations de la substance d'essai sont déterminées dans les deux phases. Chaque détermination de Poe est effectuée en utilisant au moins trois expériences de brassage lent indépendantes dans des conditions identiques. La régression employée pour démontrer que l'équilibre a été atteint doit s'appuyer sur les résultats d’au moins de quatre déterminations de Co/Ce à quatre moments ponctuels successifs.

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Cette méthode d’essai est conçue pour évaluer la toxicité de substances sur des plantes dulcicoles du genre Lemna (lentille d’eau). Des monocultures du genre Lemna (Lemna gibba et Lemna minor habituellement), en phase de croissance exponentielle, sont exposées à au moins cinq concentrations de la substance d'essai sur une période de sept jours. L'objectif de l'essai est de quantifier les effets de la substance sur la multiplication végétative des lentilles d'eau durant cette période, à partir de l’évaluation de plusieurs paramètres. L'essai limite correspond à un niveau de dose de 100 mg/l. Cette étude inclut la mesure du pH, de l'intensité lumineuse, des concentrations de la substance d'essai, le comptage du nombre de thalles et la mesure d'un autre paramètre au moins (superficie totale des thalles, poids sec ou poids frais). La concentration entraînant un pourcentage donné d'inhibition du taux de croissance (ou du rendement) est déterminée en fonction des taux de croissance spécifiques moyens (ou du rendement) relevés dans une série de solutions expérimentales et exprimée sous la forme CxEt (ou CxEr). Un autre effet mesuré est le rendement. En outre, la concentration minimale avec effet observé (CMEO) et la concentration sans effet observé (CSEO) peuvent être déterminées par un calcul statistique.

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  Cette Ligne directrice est une méthode de dépistage pour l'évaluation de la biodégradabilité facile de substance chimique. La substance d'essai, normalement à 20 mg C/L, représentant la seule source de carbone et d’énergie, est incubée (pendant 28 jours normalement) dans des bouteilles scellées, en aérobiose, contenant un milieu tampon composé de sels minéraux, dans lequel a été ensemencée une population mixte de micro-organismes. Afin de vérifier la procédure d'essais, une substance de référence (éthylèneglycol, benzoate de sodium ou aniline et 1-octanol), à la biodégradabilité connue, doit être testée en parallèle. On recommande d’analyser trois réplicats de flacon après un nombre suffisant d'intervalles de temps. De même, au moins cinq flacons (les flacons d'essai, les flacons témoins blanc, et les flacons avec la substance de référence) sont analysés à la fin de l'essai, afin de calculer les intervalles de confiance à 95% pour le pourcentage moyen de biodégradation. L'évolution de CO2 dégagé par la biodégradation aérobie finale de la substance d'essai est déterminée en mesurant l’excèdent de carbone inorganique (CI) produit dans les flacons d'essai par rapport à celui produit dans les flacons témoins blanc ne contenant que le milieu ensemencé. Le degré de biodégradation est exprimé en pourcentage de la production maximale théorique de CI (ThCI), basé sur la quantité de substance d'essai ajoutée au départ. Une biodégradation >60% de la ThCI, dans l’intervalle de 10 jours au cours de cet essai, démontre que la substance d'essai est facilement biodégradable en aérobiose.

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